HTD平衡透析装置白皮书

HTD的不同：深入了解HTD平衡透析系统

20多年来，我们与平衡透析领域的科学家们保持着紧密的合作。秉持着科研精神，我们更推荐您使用HTD系统而非其他产品来满足您的实验需求。主要原因如下：

 达到平衡所需时间-分清营销神话和现实的关系

 经过对多种平衡透析产品的评估，科学家们报告称：HTD系统相比其他竞争产品能更快地达到平衡状态。HTD系统同时具有更高的膜表面积／取样体积比和更低的非特异性结合率，因此许多化合物能在4小时内达到平衡状态。默克公司（见出版物）的研究员们日常透析时间为4个小时。

在我们的一般方案中，我们推荐使用6小时的保守孵化时间，以此在标准的8小时工作日内完成透析系统设置，培养和样本采集工作。我们建议在进行任何结合实验之前，先做一个简单的动力学测试，将化合物添加到缓冲溶液中，并对缓冲液进行透析，以评估所需的平衡时间（针对新化合物）。

 选择具有低非特异性结合的材料

 潜在的非特异性结合问题：HTD的分析模块100％由特氟龙模块构成。众所周知，特氟龙对蛋白质和检测目标化合物的非特异性结合率都非常低。这点与其他的分析系统有着显著的不同，它们通常使用聚苯乙烯、聚丙烯或聚碳酸酯材料制备，而这些材料都具有非特异性结合的特性。

与非特性结合相关的挑战：测试化合物与平衡透析系统中所使用各类塑料的非特异性结合会显著增加高度结合的化合物达到平衡所需的时间。尽管血清蛋白可有效阻断透析系统中血清一侧的部分非特异性结合，但这些阻断剂并不存在于缓冲溶液一侧。当少量的测试化合物逐渐通过透析膜时，它们会被缓冲溶液一侧的非特异性结合塑料吸收。对于RED系统来说，塑料的非特性结合和缓冲溶液侧的大量液体会大大延长系统达到平衡的时间，并干扰游离分数的计算。

 通过可重复使用，环境友好的设计实现行业领先的成本效率

 HTD实验系统每次实验的耗材成本低于0.49美元。由于竞争对手采用丢弃设施，购买HTD实验系统的投资费用在4-5次实验后即可收回。此外，可重复使用的Teflon模块设计比一次性使用的可丢弃塑料制品更环保。

使用样品体积

用于实验的血浆／血清／组织和化合物的相关费用应作为整个实验费用的一部分来考虑。HTD系统一般建议在透析膜的每一侧加入75-150uL的样品。RED系统建议在样品一侧加入300uL，在缓冲区一侧加入500uL。这大大增加了与血浆／血清／组织和化合物相关的成本。此外，在缓冲区一侧加入的大量溶液会大大稀释化合物，并增加达到平衡所需的时间（在达到平衡前须有更多的化合物穿过透析膜），导致检测的灵敏度降低。

减少手动时间

HTD系统的设计可以在几分钟内完成安装和拆卸。20多年来，这点一直是得到我们的用户群所认可的。值得注意的是，HTD系统所需的手动操作时间很少，而此前行业内的竞争者一直错误地将安装时间计算在内，以达到歪曲成本效益的目的。大多数透析膜制造商建议使用前将透析膜水化至少一个小时。我们建议客户将透析膜在添加10％醇的缓冲溶液中水合过夜。透析膜存放在冰箱中很稳定，用适合实验的buffer快速冲洗后，就可以完全水化／使用了。这种方法减少了设置时间，并可确保透析膜的平均孔径稳定。Ye和Chen最近发表的一篇文章表明，在使用前需要对RED膜进行预处理／水化（Improving the accuracy of unbound fraction measurement of drug-protein binding by preconditioning the RED membrane inserts,Ye and Chen Bioanalysis, vol 12, No.23:2020).

使减少手动时间通过自动化兼容实现规模化

HTD系统与自动化移液平台和96道移液设备完全兼容，目前我们的客户正使用来自众多品牌的不同产品。